Faafetai mo lou asiasi mai i le Nature.com. O le lomiga o le browser o loʻo e faʻaaogaina e le lava le lagolago CSS. Mo ni taunuuga sili ona lelei, matou te fautuaina oe e faʻaaoga se lomiga fou o lau browser (pe tape le Compatibility Mode i le Internet Explorer). I le taimi nei, ina ia mautinoa le lagolagoina pea, o loʻo matou faʻaalia le 'upega tafaʻilagi e aunoa ma se mamanu poʻo le JavaScript.
E masani ona fa'aaogaina vaila'au fa'amate fungicide i le taimi e fuga ai fua o la'au ma e mafai ona lamatia ai iniseti e fa'atupuina ai le fe'avea'i. Peita'i, e itiiti se mea e iloa e uiga i le auala e tali atu ai vaila'au fa'amate fungicide e le o ni pi (e pei o pi tuto'atasi, Osmia cornifrons) i vaila'au fa'amate fungicide e feso'ota'i ma fa'ama'i e masani ona fa'aaogaina i apu i le taimi e fuga ai. O lenei va o le malamalama e fa'atapula'aina ai fa'ai'uga fa'atonutonu e fuafua ai le saogalemu o le fa'aogaina ma le taimi e fa'asusu ai le fungicide. Na matou iloiloina aafiaga o vaila'au fa'amate fungicide e lua e feso'ota'i (captan ma mancozeb) ma vaila'au fa'amate fungicide e fa i le va o vaega/phytosystem (ciprocycline, myclobutanil, pyrostrobin ma le trifloxystrobin). Aafiaga i le fa'ateleina o le mamafa o le larva, le ola, le fua fa'atatau o itupa ma le eseesega o siama. Na faia le iloiloga e fa'aaoga ai se bioassay tu'ugutu tumau lea na togafitia ai le pollen i ni tui e tolu e fa'atatau i le tui fautuaina i le taimi nei mo le fa'aaogaina i le fanua (1X), le afa tui (0.5X) ma le tui maualalo (0.1X). O tui uma o le mancozeb ma le pyritisoline na fa'aitiitia ai le mamafa o le tino ma le ola o le larva. Ona matou fa'asologa lea o le gene 16S e fa'ailoa ai le bacteriome o le larva o le mancozeb, o le fungicide e mafua ai le maualuga o le oti. Na matou iloa ai ua matuā faaitiitia le tele o siama ma le tele o siama i anufe na fafagaina i le poleni ua togafitia i le mancozeb. O taunuuga o a matou suesuega ua faaalia ai o le fanaina o nisi o nei vailaau faamalūlū i le taimi o fuga e matua afaina ai le soifua maloloina o le O. cornifrons. O lenei faamatalaga e taua mo faaiuga tau pulega i le lumanai e faatatau i le faaaogaina gafataulimaina o oloa puipuia o laau fua ma e avea o se faavae mo faiga faatonutonu e faatatau i le puipuia o mea e faasalalau ai siama.
O le pi mason e to’atasi o Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) na fa’afeiloa’i mai i le Iunaite Setete mai Iapani i le fa’ai’uga o le vaitau o le 1970 ma le amataga o le vaitau o le 1980, ma o lenei ituaiga ua i ai se matafaioi taua i le fa’apupulaina o pi i totonu o si’osi’omaga pulea talu mai lena taimi. O faitau aofa’i fa’alenatura o lenei pi o se vaega o le tusa ma le 50 ituaiga o pi vao e fa’aopoopo i pi e fa’apupulaina ai togālaau o le almond ma le apu i le Iunaite Setete2,3. O pi Mason e feagai ma le tele o lu’itau, e aofia ai le vaevaeina o nofoaga, siama, ma vaila’au fa’asaina manu3,4. I totonu o vaila’au fa’asaina manu, o vaila’au fa’asaina manu e fa’aitiitia ai le maua o le malosi, sailiga mea’ai5 ma le fa’aleleia o le tino6,7. E ui o su’esu’ega talu ai nei o lo’o fa’ailoa mai ai o le soifua maloloina o pi Mason e a’afia sa’o lava e meaola ninii commensal ma ectobactic, 8,9 ona e mafai e siama ma fungi ona a’afia ai mea’ai ma tali atu i le puipuiga, o a’afiaga o le fa’aalia o vaila’au fa’asaina manu i le eseesega o siama o pi Mason ua amata ona su’esu’eina.
O vailaʻau faʻamaʻi pipisi o aʻafiaga eseese (faʻafesoʻotaʻi ma faʻaletino) e faʻasusuina i togālaau aʻo leʻi fuga ma aʻo leʻi fuga e togafitia ai faʻamaʻi e pei o le pala o le apu, pala oona, pala enaena ma le pala o le pauta10,11. O vailaʻau faʻamaʻi pipisi e manatu e le afaina i manu feʻai, o lea e fautuaina ai i latou i le au fai togalaau i le taimi o fuga; O le faʻaalia ma le foloina o nei vailaʻau faʻamaʻi pipisi e pi e lauiloa tele, aua o se vaega o le faagasologa o le resitalaina o vailaʻau faʻamaʻi e le US Environmental Protection Agency ma le tele o isi ofisa faʻatonutonu a le atunuʻu12,13,14. Peitaʻi, o aʻafiaga o vailaʻau faʻamaʻi pipisi i tagata e le o ni pi e le o ni pi e le o iloa tele aua e le manaʻomia i lalo o maliega faʻatagaina tau maketi i le Iunaite Setete15. E le gata i lea, e masani lava e leai ni faʻatulagaga faʻatulagaina mo le suʻeina o pi taʻitasi16,17, ma o le tausia o kolone e saunia ai pi mo suʻega e faigata18. O loʻo faʻateleina le faia o suʻega o pi eseese e pulea i Europa ma le ISA e suʻesuʻe ai aʻafiaga o vailaʻau faʻamaʻi pipisi i pi vao, ma ua faʻatoʻā atiaʻe talu ai nei faʻatulagaga faʻatulagaina mo O. cornifrons19.
O pi e iai ona nifo o ni monocytes ma e fa'aaogaina fa'apisinisi i fa'ato'aga kapa e fai ma fa'aopoopoga po'o se sui mo pi meli. O nei pi e tula'i mai i le va o Mati ma Aperila, ma pi tane e vave ona fananau mai i le tolu i le fa aso a'o le'i o'o i pi fafine. A mae'a ona faiaiga, e aoina e le fafine le poleni ma le nectar e saunia ai se fa'asologa o sela o pepe i totonu o le pu o le faamoega (fa'alenatura po'o le fa'apitoa)1,20. E tu'u fuamoa i luga o le poleni i totonu o sela; ona fausia lea e le fafine se puipui omea a'o le'i saunia le isi sela. O le instar muamua o pepe e si'omia i totonu o le chorion ma fafaga i vai o le pepe. Mai le instar lona lua i le lima (prepupa), e fafaga e pepe le poleni22. A uma ona fa'aitiitia le sapalai o le poleni, e fausia e pepe ni cocoons, pupate ma tula'i mai o ni tagata matutua i le potu lava e tasi o pepe, e masani lava i le fa'ai'uga o le taumafanafana20,23. E tula'i mai pepe matutua i le tautotogo e soso'o ai. O le ola o le tagata matua e feso'ota'i ma le fa'ateleina o le malosi (fa'ateleina o le mamafa) e fa'atatau i mea'ai e 'ai. O le mea lea, o le tulaga lelei o mea'ai o le poleni, fa'apea fo'i ma isi mea e pei o le tau po'o le a'afia i vaila'au fa'asaina, o mea ia e fa'atatau i le ola ma le soifua maloloina24.
O vailaʻau faʻasaina iniseti ma vailaʻau faʻasaina iniseti e faʻaaogaina aʻo leʻi fuga e mafai ona gaoioi i totonu o le toto o le laʻau i ni tikeri eseese, mai le translaminar (e pei o le mafai ona gaoioi mai le pito i luga o laulaau i le pito i lalo, e pei o nisi vailaʻau faʻasaina iniseti) 25 i ni aafiaga moni lava i le tino. , lea e mafai ona sosolo i le pale mai aʻa, e mafai ona ulufale i le nectar o fugalaʻau apu 26, lea e mafai ona latou fasiotia ai le O. cornifrons matutua 27. O nisi vailaʻau faʻasaina iniseti e sosolo atu foʻi i totonu o le poleni, e aʻafia ai le atinaʻeina o anufe sana ma mafua ai lo latou oti 19. O isi suʻesuʻega ua faʻaalia ai e mafai e nisi vailaʻau faʻasaina iniseti ona suia tele le amioga o le faʻamoega o le ituaiga e fesoʻotaʻi O. lignaria 28. E le gata i lea, o suʻesuʻega i fale suʻesuʻe ma fanua e faʻataʻitaʻi ai tulaga o le aʻafia i vailaʻau faʻasaina iniseti (e aofia ai vailaʻau faʻasaina iniseti) ua faʻaalia ai o vailaʻau faʻasaina iniseti e aʻafia ai le physiology 22 morphology 29 ma le ola o pi meli ma nisi pi tutoʻatasi. O le tele o vailaʻau faʻasaina iniseti e faʻaaogaina saʻo i fugalaʻau matala i le taimi o fuga e ono faʻaleagaina ai le poleni na aoina e tagata matutua mo le atinaʻeina o anufe, o aʻafiaga o loʻo i ai pea e tatau ona suʻesuʻeina 30.
Ua fa’ateleina ona iloa o le atina’eina o anufe e a’afia e le poleni ma nu’u siama o le faiga o mea’ai. O le siama o le pi meli e a’afia ai tulaga e pei o le mamafa o le tino31, suiga o le metabolism22 ma le vaivai i siama32. O su’esu’ega ua mavae na su’esu’eina ai le a’afiaga o le tulaga o le atina’e, mea’ai, ma le siosiomaga i siama o pi e to’atasi. O nei su’esu’ega na fa’aalia ai ni mea tutusa i le fausaga ma le tele o siama o pi e to’atasi ma poleni33, fa’apea fo’i ma le ituaiga siama e masani ona maua o le Pseudomonas ma le Delftia, i totonu o ituaiga pi e to’atasi. Peita’i, e ui lava ina feso’ota’i vaila’au fa’ama’i ma ta’iala e puipuia ai le soifua maloloina o pi, ae o a’afiaga o vaila’au fa’ama’i i siama o pi e ala i le tu’usa’o o le gutu e le’i su’esu’eina lava.
O lenei suʻesuʻega na faʻataʻitaʻiina ai aafiaga o tui moni o vailaʻau faʻamaʻi e ono e masani ona faʻaaogaina na resitalaina mo le faʻaaogaina i fua o laʻau i le Iunaite Setete, e aofia ai vailaʻau faʻamaʻi paʻi ma vailaʻau faʻamaʻi e tuʻuina atu i le gutu i anufe o le anufe o le sana mai meaʻai ua pisia. Na matou iloa ai o vailaʻau faʻamaʻi paʻi ma vailaʻau faʻamaʻi e faʻaitiitia ai le mamafa o le tino o pi ma faʻateleina ai le oti, faʻatasi ai ma aafiaga sili ona ogaoga e fesoʻotaʻi ma le mancozeb ma le pyrithiopide. Ona matou faʻatusatusa lea o le eseesega o siama o anufe na fafagaina i le taumafataga o le poleni na togafitia i le mancozeb ma i latou na fafagaina i le taumafataga faʻatonutonu. Matou te talanoaina auala e ono mafua ai le oti ma aafiaga mo polokalame faʻapitoa o le puleaina o manu faʻamaʻi ma manu feʻai (IPPM)36.
O O. cornifrons matutua na nonofo i totonu o ni kokoni i le taumalulu na maua mai le Nofoaga Autu mo Suesuega Fua, Biglerville, PA, ma teuina i le −3 i le 2°C (±0.3°C). A o lei faia le faataitaiga (600 kokoni i le aofaiga atoa). Ia Me 2022, e 100 kokoni o le O. cornifrons na fesiita’i i aso taitasi i totonu o ipu palasitika (50 kokoni i le ipu, DI 5 cm × 15 cm le umi) ma tuu ni solo i totonu o ipu e faafaigofie ai le tatalaina ma maua ai se mea e mafai ona lamuina, e faaitiitia ai le atuatuvale i pi maa37. Tuu ni ipu palasitika se lua o lo’o i ai kokoni i totonu o se pa iniseti (30 × 30 × 30 cm, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) faatasi ai ma le 10 ml mea e fafaga ai o lo’o i ai le 50% o le sucrose solution ma teu mo aso e fa e faamautinoa ai le tapunia ma le faaipoipoina. 23°C, 60% le susu o le ea, 10 l le umi o le malamalama i le la (malosi maualalo): 14 aso. E 100 fafine ma tane ua fa'aipoipo na fa'asa'olotoina i taeao uma mo aso e ono (100 i le aso) i totonu o ni ofaga fa'apitoa se lua i le taimi o le tumutumuga o le fuga o le apu (ofaga mailei: lautele 33.66 × maualuga 30.48 × umi 46.99 cm; Ata Fa'aopoopo 1). Na tu'uina i le Pennsylvania State Arboretum, e lata ane i le cherry (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), peach (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), pea (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus perifolia 'Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), coronaria apple tree (Malus coronaria) ma le tele o ituaiga o apu (Malus coronaria, Malus), apu fa'alotoifale 'Co-op 30′ Enterprise™, Malus apple tree 'Co-Op 31′ Winecrisp™, begonia 'Freedom', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy'). O fale manu palasitika lanumoana taitasi e ofi i luga o pusa laupapa e lua. O pusa faamoega taitasi e iai paipa pepa kraft gaogao e 800 (tatala faataamilo, 0.8 cm ID × 15 cm L) (Jonesville Paper Tube Co., Michigan) ua fa'aofi i totonu o paipa cellophane e le manino (0.7 OD taga'i i poloka palasitika (T-1X plugs) e maua ai nofoaga e faamoega ai.
O pusa faamoega uma e lua sa faasaga i sasaʻe ma sa ufiufi i palasitika lanumeamata mo le togalaau (Everbilt model #889250EB12, tele o le avanoa 5 × 5 cm, 0.95 m × 100 m) e puipuia ai le ulufale atu o isumu ma manu felelei ma tuu i luga o le eleele i tafatafa o pusa eleele o le pusa faamoega. Pusa faamoega (Ata Faaopoopo 1a). Sa aoina fuamoa o le sana i aso taitasi e ala i le aoina o paipa e 30 mai faamoega ma ave i le fale suesue. Faaaoga seleulu, tipi le pito i tua o le paipa, ona tatala lea o le paipa faataamilomilo e faaali ai sela o le fanau. Sa aveese fuamoa taitasi ma a latou poleni e faaaoga ai se spatula piʻo (Microslide tool kit, BioQuip Products Inc., Kalefonia). Sa fa'asusu fuamoa i luga o le pepa faamama susu ma tuu i totonu o se ipu Petri mo le 2 itula a'o le'i fa'aaogaina i a matou fa'ata'ita'iga (Ata Faaopoopo 1b-d).
I totonu o le fale suʻesuʻe, na matou iloiloina ai le oona i le gutu o vailaʻau faʻamaʻi e ono na faʻaaogaina aʻo leʻi amataina ma aʻo leʻi fuga le apu i le tolu faʻaopoopoga (0.1X, 0.5X, ma le 1X, lea o le 1X o le faʻailoga lea e faʻaaogaina i le 100 kalone o le vai/eka. Fua maualuga o le fanua = faʻaopoopoga i le fanua). , Laulau 1). O faʻaopoopoga taʻitasi na toe faia i le 16 taimi (n = 16). E lua vailaʻau faʻamaʻi e fesootaʻi (Laulau S1: mancozeb 2696.14 ppm ma le captan 2875.88 ppm) ma vailaʻau faʻamaʻi e fa (Laulau S1: pyrithiostrobin 250.14 ppm; trifloxystrobin 110.06 ppm; myclobutanil azole 75 .12 ppm; cyprodinil 280.845 ppm) oona i fualaau ʻaina, fualaau faisua ma mea teuteu. Na matou fa'afefiloi le poleni i le fa'aaogaina o se mea olo, fa'aliliuina le 0.20 kalama i totonu o se pu (24-pu Falcon Plate), ma fa'aopoopo ma fa'afefiloi le 1 μL o le vaila'au fungicide e fausia ai le poleni pyramidal ma pu loloto e 1 mm lea na tu'u i ai fuamoa. Tu'u i le fa'aaogaina o se spatula la'ititi (Ata Fa'aopoopo 1c,d). Na teuina ipu Falcon i le vevela o le potu (25°C) ma le 70% o le susu. Na matou fa'atusatusaina i latou ma anufe pulea na fafagaina i se taumafataga poleni tutusa na togafitia i le vai mama. Na matou fa'amaumauina le oti ma fuaina le mamafa o anufe i aso uma se'ia o'o ina o'o atu anufe i le matua a'o le'i fanau mai e fa'aaoga ai se paleni fa'ata'ita'i (Fisher Scientific, sa'o = 0.0001 kalama). Mulimuli ane, na iloiloina le fua fa'atatau o feusuaiga e ala i le tatalaina o le cocoon pe a mavae le 2.5 masina.
Sa aveeseina le DNA mai le larvae atoa o le O. cornifrons (n = 3 i tulaga ta'itasi o togafitiga, poleni e togafitia ma le poleni e le'i togafitia i le mancozeb) ma sa matou faia ni su'esu'ega eseese o siama i nei fa'ata'ita'iga, aemaise lava ona o le maualuga o le oti na matauina i le mancozeb i larvae na mauaina le MnZn. Sa fa'ateleina le DNA, fa'amamāina e fa'aaoga ai le DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA kit (Zymo Research, Irvine, CA), ma fa'asologaina (600 ta'amilosaga) i luga o le Illumina® MiSeq™ e fa'aaoga ai le v3 kit. Sa faia le fa'asologa fa'atatau o genes o le RNA ribosomal 16S o siama e fa'aaoga ai le Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) e fa'aaoga ai primers e fa'atatau i le vaega V3-V4 o le gene 16S rRNA. E le gata i lea, sa faia le fa'asologa 18S e fa'aaoga ai le 10% PhiX inclusion, ma sa faia le fa'ateleina e fa'aaoga ai le primer pair 18S001 ma le NS4.
Fa'aulufale mai ma fa'agasolo faitauga fa'atasi39 e fa'aaoga ai le QIIME2 pipeline (v2022.11.1). O nei faitauga na tipiina ma tu'ufa'atasia, ma aveese fa'asologa chimeric e fa'aaoga ai le plugin DADA2 i le QIIME2 (qiime dada2 noise pairing)40. O tofiga vasega 16S ma le 18S na fa'atinoina e fa'aaoga ai le plugin object classifier Classify-sklearn ma le artifact silva-138-99-nb-classifier ua uma ona a'oa'oina.
O faʻamaumauga uma o faʻataʻitaʻiga na siakiina mo le tulaga masani (Shapiro-Wilks) ma le tutusa o fesuiaʻiga (Levene's test). Talu ai ona e leʻi ausia e le seti o faʻamaumauga ia manatu o le auiliiliga parametric ma e leʻi mafai e le suiga ona faʻatulagaina mea na totoe, na matou faia ai se ANOVA e lua-ala e le o ni parametric (Kruskal-Wallis) ma mea taua e lua [taimi (tolu-vaega 2, 5, ma le 8 aso taimi) ma le fungicide] e iloilo ai le aafiaga o togafitiga i le mamafa fou o le larval, ona faia lea o faʻatusatusaga faʻalua e le o ni parametric post hoc e faʻaaoga ai le suega Wilcoxon. Na matou faʻaaogaina se faʻataʻitaʻiga laina lautele (GLM) ma se Poisson distribution e faʻatusatusa ai aafiaga o fungicides i le ola i le tolu fungicide concentrations41,42. Mo le auiliiliga o le tele o eseesega, o le aofaʻi o amplicon sequence variants (ASVs) na faʻaitiitia i le tulaga o le genus. O fa'atusatusaga o le tele o eseesega i le va o vaega e fa'aaoga ai le 16S (tulaga o le ituaiga) ma le tele o le 18S na fa'atinoina e fa'aaoga ai se fa'ata'ita'iga fa'aopoopo lautele mo le tulaga, fua, ma foliga (GAMLSS) fa'atasi ai ma le beta zero-inflated (BEZI) fa'asalalauga o aiga, ia na fa'ata'ita'iina i luga o se macro . i le Microbiome R43 (v1.1). 1). Ave'ese ituaiga mitochondrial ma chloroplast a'o le'i faia le su'esu'ega eseese. Ona o le eseese o tulaga fa'avasega o le 18S, na'o le tulaga maualalo o taxon ta'itasi na fa'aaogaina mo su'esu'ega eseese. O su'esu'ega fa'amaumauga uma na fa'atinoina e fa'aaoga ai le R (v. 3.4.3., CRAN project) (Team 2013).
O le a'afiaga i le mancozeb, pyrithiostrobin, ma le trifloxystrobin na fa'aitiitia ai le mamafa o le tino i le O. cornifrons (Ata 1). O nei aafiaga na matauina pea mo tui uma e tolu na iloiloina (Ata 1a–c). E le'i fa'aitiitia tele e le Cyclostrobin ma le myclobutanil le mamafa o anufe.
O le mamafa fou averesi o anufe o le laau na fuaina i taimi e tolu i lalo o togafitiga taumafa e fa (mea'ai poleni tutusa + vaila'au fa'afu'afu'a: fa'atonutonu, 0.1X, 0.5X ma le 1X tui). (a) Inumaga maualalo (0.1X): taimi muamua (aso 1): χ2: 30.99, DF = 6; P < 0.0001, taimi lona lua (aso 5): 22.83, DF = 0.0009; taimi lona tolu; taimi (aso 8): χ2: 28.39, DF = 6; (b) afa tui (0.5X): taimi muamua (aso 1): χ2: 35.67, DF = 6; P < 0.0001, taimi lona lua (aso muamua). ): χ2: 15.98, DF = 6; P = 0.0090; taimi lona tolu (aso 8) χ2: 16.47, DF = 6; (c) Nofoaga po'o le fua atoa (1X): taimi muamua (aso 1) χ2: 20.64, P = 6; P = 0.0326, taimi lona lua (aso 5): χ2: 22.83, DF = 6; P = 0.0009; taimi lona tolu (aso 8): χ2: 28.39, DF = 6; au'ili'iliga e le fa'atatauina o le eseesega. O pa e fa'atusalia ai le averesi ± SE o fa'atusatusaga fa'alua (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001.
I le fua maualalo (0.1X), na faʻaitiitia ai le mamafa o le tino o le anufe i le 60% i le trifloxystrobin, 49% i le mancozeb, 48% i le myclobutanil, ma le 46% i le pyrithistrobin (Ata 1a). Ina ua faʻaalia i le afa o le fua o le fanua (0.5X), na faʻaitiitia ai le mamafa o le tino o anufe mancozeb i le 86%, pyrithiostrobin i le 52% ma le trifloxystrobin i le 50% (Ata 1b). O le fua atoa o le fanua (1X) o le mancozeb na faʻaitiitia ai le mamafa o le anufe i le 82%, pyrithiostrobin i le 70%, ma le trifloxystrobin, myclobutanil ma le sangard i le tusa ma le 30% (Ata 1c).
E sili ona maualuga le oti i anufe na fafagaina i le poleni na togafitia i le mancozeb, sosoo ai ma le pyrithiostrobin ma le trifloxystrobin. Na faʻateleina le oti i le faʻateleina o le tui o le mancozeb ma le pyritisoline (Ata 2; Laulau 2). Peitaʻi, na faʻateleina teisi le oti i le corn borer aʻo faʻateleina le maualuga o le trifloxystrobin; e leʻi faʻateleina tele e le cyprodinil ma le captan le oti pe a faʻatusatusa i togafitiga faʻatonutonu.
Sa fa'atusatusa le oti o anufe o lago borer ina ua uma ona 'aina le poleni na togafitia ta'itasi i vaila'au fa'ama'i pipisi e ono. O le Mancozeb ma le pentopyramide sa sili atu ona ma'ale'ale i le fa'aalia i le gutu o anufe sana (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (laina, fa'asolo = 0.29, P < 0.001; fa'asolo = 0.24, P <0.00)).
I le averesi, i togafitiga uma, e 39.05% o gasegase o fafine ma le 60.95% o tane. I totonu o togafitiga fa'atonutonu, o le pasene o fafine e 40% i su'esu'ega maualalo (0.1X) ma le afa-fuala'au (0.5X), ma le 30% i su'esu'ega i le fanua (1X). I le 0.1X fuala'au, i totonu o anufe na fafagaina i le poleni na togafitia i le mancozeb ma le myclobutanil, 33.33% o tagata matutua o fafine, 22% o tagata matutua o fafine, 44% o anufe matutua o fafine, 44% o anufe matutua o fafine. fafine, 41% o anufe matutua o fafine, ma le vaega fa'atonutonu e 31% (Ata 3a). I le 0.5 taimi o le fua, 33% o anufe matutua i le vaega o le mancozeb ma le pyrithiostrobin o fafine, 36% i le vaega o le trifloxystrobin, 41% i le vaega o le myclobutanil, ma le 46% i le vaega o le cyprostrobin. O lenei fuainumera e 53% i le vaega. i le vaega o le captan ma le 38% i le vaega pulea (Ata 3b). I le 1X fua, 30% o le vaega o le mancozeb o fafine, 36% o le vaega o le pyrithiostrobin, 44% o le vaega o le trifloxystrobin, 38% o le vaega o le myclobutanil, 50% o le vaega pulea o fafine – 38.5% (Ata 3c).
Pasene o fa'ama'i fa'apala fafine ma tane ina ua mae'a ona a'afia i le vaila'au fa'apala. (a) Inumaga maualalo (0.1X). (b) Inumaga afa (0.5X). (c) Inumaga o le fanua po'o le inumaga atoa (1X).
O le au'ili'iliga o le fa'asologa o le 16S na fa'aalia ai le eseesega o le vaega o siama i le va o anufe na fafagaina i le poleni na togafitia i le mancozeb ma anufe na fafagaina i le poleni e le'i togafitia (Ata 4a). O le fa'asinomaga o siama o anufe e le'i togafitia na fafagaina i le poleni e maualuga atu nai lo anufe na fafagaina i le poleni na togafitia i le mancozeb (Ata 4b). E ui o le eseesega na matauina i le tamaoaiga i le va o vaega e le'i taua tele i fuainumera, ae sa matua maualalo ifo nai lo le mea na matauina mo anufe na 'ai i le poleni e le'i togafitia (Ata 4c). O le tele o meaola fa'atatau na fa'aalia ai o le microbiota o anufe na fafagaina i le poleni pulea e sili atu ona eseese nai lo anufe na fafagaina i le anufe na togafitia i le mancozeb (Ata 5a). O le au'ili'iliga fa'amatalaina na fa'aalia ai le i ai o le 28 ituaiga i fa'ata'ita'iga pulea ma fa'ata'ita'iga togafitia i le mancozeb (Ata 5b). c O le au'ili'iliga e fa'aaoga ai le fa'asologa o le 18S na le fa'aalia ai ni eseesega taua (Ata Fa'aopoopo 2).
O fa'amatalaga SAV e fa'avae i luga o fa'asologa 16S na fa'atusatusa i le tamaoaiga o Shannon ma le tamaoaiga na matauina i le tulaga o le phylum. (a) Su'esu'ega fa'amaopoopo autu (PCoA) e fa'avae i luga o le fausaga lautele o le alalafaga microbial i totonu o anufe e le'i togafitia e fafagaina i le pollen po'o le pulea (lanumoana) ma anufe e fafagaina i le mancozeb (lanu moli). O fa'amaumauga ta'itasi e fai ma sui o se fa'ata'ita'iga eseese. Na fuafuaina le PCoA e fa'aaoga ai le mamao o Bray-Curtis o le tufatufaina o le t televariate. Ovals e fai ma sui o le 80% le tulaga mautinoa. (b) Boxplot, fa'amaumauga mata o le tamaoaiga o Shannon (points) ma le c. Tamaoaiga e mafai ona matauina. O boxplots e fa'aalia ai pusa mo le laina ogatotonu, vaega interquartile (IQR), ma le 1.5 × IQR (n = 3).
O le tuufaatasiga o vaega o siama o anufe na fafagaina i poleni na togafitia ma le mancozeb. (a) O le tele o ituaiga siama e faitau i totonu o anufe. (b) Fa'afanua vevela o vaega o siama ua fa'ailoaina. Delftia (odds ratio (OR) = 0.67, P = 0.0030) ma Pseudomonas (OR = 0.3, P = 0.0074), Microbacterium (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060); O laina o fa'afanua vevela ua fa'aputuina e fa'aaoga ai le mamao o le fesoota'iga ma le feso'ota'iga averesi.
O a matou taunuuga ua faaalia ai o le tuuina i le gutu o vailaau fa'ama'i pipisi (mancozeb) ma vailaau fa'ama'i pipisi (pyrostrobin ma trifloxystrobin), lea na fa'aaogaina lautele i le taimi o fuga, na matua fa'aitiitia ai le mamafa ma fa'ateleina ai le oti o anufe sana. E le gata i lea, o le mancozeb na matua fa'aitiitia ai le eseesega ma le tamaoaiga o le microbiome i le taimi o le amataga o le tuputupu a'e. O le Myclobutanil, o le isi vailaau fa'ama'i pipisi, na matua fa'aitiitia ai le mamafa o le tino o anufe i tui uma e tolu. O lenei aafiaga na manino i le taimi lona lua (aso 5) ma le lona tolu (aso 8). I se fa'atusatusaga, o le cyprodinil ma le captan e le'i fa'aitiitia ai le mamafa po'o le ola pe a fa'atusatusa i le vaega fa'atonutonu. I lo matou iloa, o lenei galuega o le muamua lea e iloa ai aafiaga o fua o le fanua o vailaau fa'ama'i pipisi eseese e fa'aaoga e puipuia ai fa'ato'aga sana e ala i le tu'usa'o o le poleni.
O togafitiga uma e fa'aaoga ai vaila'au fa'amate siama na fa'aitiitia ai le mamafa o le tino pe a fa'atusatusa i togafitiga fa'atonutonu. O le Mancozeb na sili ona a'afia ai le mamafa o le tino o le anufe ma le averesi o le fa'aitiitia o le 51%, sosoo ai ma le pyrithiostrobin. Peita'i, o isi su'esu'ega e le'i lipotia mai ni a'afiaga leaga o fuala'au fa'amate siama i luga o tulaga o anufe44. E ui lava ina ua fa'aalia e maualalo le o'ona o dithiocarbamate biocides45, ae o le ethylene bisdithiocarbamates (EBDCS) e pei o le mancozeb e mafai ona fa'aleagaina i le urea ethylene sulfide. Ona o ona a'afiaga mutagenic i isi manu, o lenei oloa fa'aleagaina atonu e mafua ai a'afiaga na matauina46,47. O su'esu'ega na faia muamua na fa'aalia ai o le fausiaina o le ethylene thiourea e a'afia e mea e pei o le vevela maualuga48, maualuga o le susū49 ma le umi o le teuina o oloa50. O tulaga lelei o le teuina o vaila'au fa'amate siama e mafai ona fa'aitiitia ai nei a'afiaga. E le gata i lea, ua fa'aalia e le Pulega o le Saogalemu o Mea'ai a Europa le popolega e uiga i le o'ona o le pyrithiopide, lea ua fa'aalia e mafua ai le kanesa i faiga o mea'ai a isi manu51.
O le tuiina i le gutu o le mancozeb, pyrithiostrobin, ma le trifloxystrobin e faʻateleina ai le oti o anufe o le sana. I se faʻatusatusaga, o le myclobutanil, ciprocycline ma le captan e leai se aafiaga i le oti. O nei taunuuga e ese mai ia Ladurner et al.52, o ē na faʻaalia ai o le captan na faʻaitiitia tele ai le ola o le O. lignaria matua ma le Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae). E le gata i lea, o vailaʻau faʻamaʻi e pei o le captan ma le boscalid ua maua e mafua ai le oti o anufe52,53,54 pe suia ai amioga taumafa55. O nei suiga, i le isi itu, e mafai ona aʻafia ai le tulaga lelei o meaʻai o le poleni ma iu ai ina maua ai le malosi o le tulaga o anufe. O le oti na matauina i le vaega pulea e ogatasi ma isi suʻesuʻega 56,57.
O le fua faatatau o le itupa e fiafia i ai tane na matauina i la matou galuega e mafai ona faamatalaina e ala i mea e pei o le le lava o le faigauo ma tulaga leaga o le tau i le taimi o le fuga, e pei ona fautuaina muamua mo le O. cornuta e Vicens ma Bosch. E ui o fafine ma tane i la matou suʻesuʻega e fa aso e faia ai le faigauo (o se vaitaimi e masani ona manatu e lava mo le manuia o le faigauo), na matou faʻaitiitia ma le loto i ai le malosi o le malamalama e faʻaitiitia ai le atuatuvale. Peitaʻi, o lenei suiga e ono faʻalavelaveina ai le faagasologa o le faigauo61. E le gata i lea, e tele aso o le tau leaga e oʻo i ai pi, e aofia ai le timu ma le maualalo o le vevela (<5°C), lea e mafai foi ona aʻafia ai le manuia o le faigauo4,23.
E ui o la matou suʻesuʻega na taulaʻi i le microbiome atoa o anufe, ae o a matou taunuuga e maua ai se malamalamaaga i sootaga e ono mafai ona iai i le va o nuʻu o siama e ono taua tele i meaʻai a pi ma le aʻafia i fungicide. Mo se faʻataʻitaʻiga, o anufe na fafagaina i le pollen na togafitia i le mancozeb na matua faʻaitiitia ai le fausaga ma le tele o nuʻu o siama pe a faʻatusatusa i anufe na fafagaina i le pollen e leʻi togafitia. I anufe na 'aina le pollen e leʻi togafitia, o vaega o siama o le Proteobacteria ma le Actinobacteria sa sili ona taatele ma e tele lava ina aerobic pe facultatively aerobic. O siama o le Delft, e masani ona fesootaʻi ma ituaiga pi e toʻatasi, ua iloa e iai le gaioiga faʻamaʻi, e faʻaalia ai se matafaioi puipuia e ono iai faʻasaga i siama. O le isi ituaiga siama, o le Pseudomonas, sa tele i anufe na fafagaina i le pollen e leʻi togafitia, ae na matua faʻaitiitia i anufe na togafitia i le mancozeb. O a matou taunuuga e lagolagoina ai suʻesuʻega na muamua faia ma faʻamaonia ai le Pseudomonas o se tasi o genera e sili ona tele i le O. bicornis35 ma isi anufe toʻatasi34. E ui lava e le'i su'esu'eina fa'amaoniga fa'ata'ita'i mo le matafaioi a Pseudomonas i le soifua maloloina o le O. cornifrons, ae ua fa'aalia o lenei siama e fa'alauiloa ai le fa'aputuina o mea oona puipuia i totonu o le beetle Paederus fuscipes ma fa'alauiloa ai le metabolism o le arginine i totonu o le vitro 35, 65. O nei matauga e fa'ailoa mai ai se matafaioi e ono iai i le puipuiga o siama ma siama i le taimi o le atina'eina o le O. cornifrons larvae. O le Microbacterium o se isi ituaiga ua fa'ailoa mai i la matou su'esu'ega ua lipotia mai o lo'o iai i le tele o numera i totonu o le black soldier fly larvae i lalo o tulaga o le matelaina66. I totonu o le O. cornifrons larvae, e mafai e microbacteria ona fesoasoani i le paleni ma le maufetuuna'i o le gut microbiome i lalo o tulaga o le atuatuvale. E le gata i lea, o lo'o maua le Rhodococcus i totonu o le O. cornifrons larvae ma ua lauiloa i ona tomai e fa'amamā ai siama67. O lenei ituaiga e maua fo'i i totonu o le manava o le A. florea, ae e matua maualalo lava68. O a matou taunu'uga e fa'aalia ai le iai o le tele o suiga fa'asolopito i le tele o microbial taxa e mafai ona suia ai faiga fa'asolosolo i totonu o larvae. Peita'i, e mana'omia se malamalamaga sili atu i le eseesega o galuega a le O. cornifrons.
I se aotelega, o faʻaiʻuga o loʻo faʻaalia ai o le mancozeb, pyrithiostrobin, ma le trifloxystrobin na faʻaitiitia ai le mamafa o le tino ma faʻateleina ai le oti o anufe o le sana. E ui o loʻo faʻatupulaʻia le popolega e uiga i aʻafiaga o vailaʻau faʻamaʻi pipisi i meaola faʻasalalau, ae o loʻo iai se manaʻoga e malamalama atili ai i aʻafiaga o metabolites o totoe o nei vailaʻau. O nei faʻaiʻuga e mafai ona tuʻufaʻatasia i fautuaga mo polokalame faʻatautaia tuʻufaʻatasi o meaola faʻasalalau e fesoasoani i faifaʻatoʻaga e ʻaloʻese ai mai le faʻaaogaina o nisi vailaʻau faʻamaʻi pipisi aʻo leʻi ma aʻo fuga mai laʻau fua e ala i le filifilia o vailaʻau faʻamaʻi pipisi ma fesuiaʻi le taimi e faʻaaogaina ai, pe e ala i le faʻamalosiauina o le faʻaaogaina o isi vailaʻau e itiiti le afaina 36. E taua lenei faʻamatalaga mo le atinaʻeina o fautuaga. i le faʻaaogaina o vailaʻau faʻamaʻi pipisi, e pei o le fetuʻunaʻi o polokalame faʻasusu o loʻo iai nei ma le suia o le taimi e faʻasusu ai pe a filifilia vailaʻau faʻamaʻi pipisi poʻo le faʻalauiloaina o le faʻaaogaina o isi vailaʻau e itiiti le lamatia. E manaʻomia nisi suʻesuʻega i aʻafiaga leaga o vailaʻau faʻamaʻi pipisi i le fua faatatau o feusuaiga, amioga fafagaina, microbiome o le manava, ma faiga faʻamolekiula e mafua ai le paʻu o le mamafa ma le oti o le sana.
O faʻamaumauga autu 1, 2 ma le 3 i Ata 1 ma le 2 ua teuina i le nofoaga e teu ai faʻamaumauga o le figshare DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 ma le https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233. O faʻasologa na suʻesuʻeina i le suʻesuʻega o loʻo iai nei (Ata 4, 5) o loʻo maua i le nofoaga e teu ai faʻamaumauga o le NCBI SRA i lalo o le numera faʻaopoopo PRJNA1023565.
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