Faafetai mo le asiasi ile Nature.com.Ole lomiga ole su'esu'ega o lo'o e fa'aogaina e fa'atapula'aina le lagolago a le CSS.Mo fa'ai'uga sili, matou te fautua atu e te fa'aogaina se fa'amatalaga fou o lau su'esu'ega (pe fa'amalo le Faiga Fa'atatau ile Internet Explorer).I le taimi nei, ina ia mautinoa le lagolago faifaipea, o loʻo matou faʻaalia le saite e aunoa ma le siiina poʻo le JavaScript.
Fungicides e masani ona faʻaaogaina i le taimi o le fuga o fua o laau ma e mafai ona lamatia ai iniseti pollinators.Peita'i, e itiiti se mea e iloa pe fa'afefea ona tali atu tagata pollinators e le o ni pi (fa'ata'ita'iga, pi na'o, Osmia cornifrons) i fa'afeso'ota'i ma fungicides fa'aogaina e masani ona fa'aogaina i apu a'o fuga.O lenei va o le malamalama e fa'atapulaaina ai fa'ai'uga fa'atulafonoina e fa'amautu ai le fa'aputuga saogalemu ma le taimi e fa'asa ai le fungicide.Na matou iloiloina a'afiaga o fungicides fa'afeso'ota'i se lua (captan ma mancozeb) ma fungicides interlayer/phytosystem e fa (ciprocycline, myclobutanil, pyrostrobin ma trifloxystrobin).Aafiaga i luga o le mamafa o larval, ola, fua faatatau o feusuaiga ma siama eseese.O le su'esu'ega na faia i le fa'aaogaina o se su'esu'ega tu'u masani masani lea na togafitia ai le pollen i ni tui se tolu e fa'atatau i le fua o lo'o fautuaina nei mo le fa'aogaina o le fanua (1X), afa fua (0.5X) ma le fua maualalo (0.1X).O tui uma o le mancozeb ma le pyritisoline e matua fa'aitiitia ai le mamafa o le tino ma le ola ola.Ona matou fa'asologa lea o le kenera 16S e fa'ailoa ai le siama o le mancozeb, le fungicide e nafa ma le maualuga o le oti.Na matou iloa o le eseesega o siama ma le tele na matua faʻaititia i larvae fafaga i le mancozeb-treated pollen.O fa'ai'uga a le matou falesu'esu'e ua fa'ailoa mai ai o le su'iina o nisi o nei fungicide i le taimi o fuga e matua afaina ai le soifua maloloina o O. cornifrons.O nei fa'amatalaga e talafeagai mo fa'ai'uga a le pulega i le lumana'i e fa'atatau i le fa'aogaina gafataulimaina o fuala'au 'aina e puipuia ai laau ma avea ma fa'avae mo faiga fa'atonutonu e fa'atatau i le puipuia o pollinators.
O le mason bee Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) na fa'afeiloa'i i le Iunaite Setete mai Iapani i le fa'ai'uga o le 1970s ma le amataga o le 1980s, ma o le ituaiga o lo'o i ai se sao taua o pollinator i fa'alapotopotoga fa'anatura fa'atonutonu talu mai lena taimi.O le faitau aofa'i fa'ale-natura o lenei pi o se vaega o le tusa ma le 50 ituaiga o pi vao e fa'aopoopo i pi o lo'o fa'aputuina fa'ato'aga almond ma apu i le Iunaite Setete2,3.O pi Mason e feagai ma le tele o luitau, e aofia ai le vaeluaina o nofoaga, pathogens, ma vailaau e tineia ai manu faalafua3,4.Faatasi ai ma insecticides, fungicides e faʻaitiitia ai le malosi, suʻesuʻe5 ma le faʻamalosia o le tino6,7.E ui lava o suʻesuʻega talu ai nei o loʻo fautua mai ai o le soifua maloloina o le pi a Mason e aʻafia saʻo e microorganisms commensal ma ectobactic, 8,9 ona o siama ma sigi e mafai ona aʻafia ai meaʻai ma tali puipuia, o aʻafiaga o le fungicide faʻaalia i luga o le microbial diversity o Mason pi ua faatoa amata ona avea. su'esu'e.
Fungicides o a'afiaga eseese (fa'afeso'ota'i ma fa'aogaina) e sausau i totonu o fa'ato'aga a'o le'i tupu ma a'o fuga e togafitia fa'ama'i e pei o le pa'u apu, pala oona, pala enaena ma le pa'u palapala10,11.Fungicides e manatu e le afaina i pollinators, o lea e fautuaina ai i le au fai togalaau i le vaitau o le fuga;O le fa'aalia ma le inuina o nei fungicides e lagomeli e fai si lauiloa, ona o se vaega o le fa'agasologa o le resitalaina o vailaau fa'asaina e le US Environmental Protection Agency ma le tele o isi fa'alapotopotoga fa'atonutonu a le atunu'u12,13,14.Peita'i, o a'afiaga ole fungicide i luga ole pi e le iloa ona e le mana'omia i lalo ole maliega tau fa'atauga ile Iunaite Setete15.E le gata i lea, e masani lava e leai ni tulafono fa'ata'atia mo le su'eina o pi ta'itasi16,17, ma o le fa'atumauina o kolone e maua ai pi mo su'ega e lu'itau18.O fa'ata'ita'iga o lagomeli eseese o lo'o fa'atuputeleina i Europa ma Amerika e su'esu'e ai a'afiaga o vaila'au fa'ama'i i pi vao, ma fa'ata'ita'i fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga mo O. cornifrons19.
O pi lago e monocytes ma o lo'o fa'aaogaina fa'apisinisi i fa'ato'aga kapo e fai ma fa'aopoopoga po'o le sui o pi meli.O nei lagomeli e tutupu mai i le va o Mati ma Aperila, ma o manu po'a e tutupu mai i le tolu i le fa aso a'o le'i o'o i fafine.A mae'a fa'aipoipoga, e fa'aputuina malosi e le fafine le poleni ma le nectar e maua ai se fa'asologa o sela fa'ato'aga i totonu o le oga fa'ato'aga (fa'alenatura po'o le fa'afoliga)1,20.E tuu fuamoa i luga o poleni i totonu o sela;ona fausia lea e le fafine se puipui omea a o leʻi saunia le isi sela.O larvae fa'atosina muamua o lo'o fa'apipi'iina i totonu o le chorion ma fafaga i sua embryonic.Mai le lona lua i le fa'ata lima (prepupa), e 'ai e le larvae le poleni22.O le taimi lava e matua'i uma ai le sapalai o le poleni, ona faia loa lea o ni kokoni, ma'i ma alia'e mai o ni tagata matutua i le potu e tasi, e masani lava i le faaiuga o le taumafanafana20,23.O tagata matutua e tulaʻi mai i le tautotogo e sosoo ai.O le ola a tagata matutua e feso'ota'i ma le maua o le malosi (ga'i mamafa) e fa'atatau i mea'ai.O le mea lea, o le lelei o mea'ai o le poleni, fa'apea fo'i ma isi mea e pei o le tau po'o le aafia i vailaau fa'ato'aga, e fa'amautu ai le ola ma le soifua maloloina24.
Insecticides ma fungicides fa'aoga a'o le'i fuga e mafai ona fe'avea'i i totonu o le vasculature o la'au i ni tikeri eseese, mai le translaminar (fa'ata'ita'iga, e mafai ona soso'o mai le pito i luga o laulaau i le pito i lalo, e pei o nisi fungicides) 25 i aafiaga fa'aletino moni., lea e mafai ona ati i le pale mai a'a, e mafai ona ulu atu i le nectar o fugalaau apu26, lea e mafai ona latou fasiotia tagata matutua O. cornifrons27.O nisi vaila'au fa'ato'aga e liu fo'i i poleni, e a'afia ai le fa'atupuina o togo saga ma mafua ai ona feoti.O isi su'esu'ega ua fa'aalia ai o nisi fungicides e mafai ona matua suia ai le fa'amoega o meaola fa'atasi O. lignaria28.E le gata i lea, o su'esu'ega a le falesu'esu'e ma le fanua fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga o le fa'aaliaina o vailaau fa'asaina (e aofia ai fungicides) ua fa'aalia ai e leaga le a'afiaga o vaila'au physiology 22 morphology 29 ma le olaola o pi meli ma nisi pi.O fugala'au eseese e fa'aoga sa'o i fugala'au matala a'o fuga e ono afaina ai poleni e aoina e tagata matutua mo le atina'eina o larval, o a'afiaga o lo'o tumau pea ona su'esu'eina30.
O lo'o fa'atupula'ia le iloa o le fa'atupuina o larval e a'afia i pollen ma microbial community o le faiga o mea'ai.Ole microbiome ole lagomeli e a'afia ai vaega e pei ole tele ole tino31, suiga ole metabolic22 ma le a'afia ile pathogens32.O suʻesuʻega muamua na suʻesuʻeina le aʻafiaga o le atinaʻe, meaʻai, ma le siosiomaga i luga ole microbiome o pi.O nei suʻesuʻega na faʻaalia ai mea tutusa i le fausaga ma le tele o le larval ma pollen microbiomes33, faʻapea foʻi ma le tele o siama siama Pseudomonas ma Delftia, i totonu o ituaiga lagomeli.Ae ui i lea, e ui lava ina feso'ota'i fungicides ma ta'iala e puipuia ai le soifua maloloina o pi, o a'afiaga o fungicides i luga o larval microbiota e ala i le tu'u tu'u sa'o e tumau pea le le su'esu'eina.
O lenei su'esu'ega na fa'ata'ita'iina ai a'afiaga o vaila'au fa'amasani e ono e masani ona fa'aogaina mo le fa'aogaina i fua o la'au i le Iunaite Setete, e aofia ai vaila'au fa'afeso'ota'i ma fa'agata fa'aogaina e tu'u gutu i togo moth anufe sana mai mea'ai leaga.Na matou iloa o le faʻafesoʻotaʻi ma le faʻaogaina o fungicides na faʻaititia ai le mamafa o le tino pi ma faʻateleina le oti, faʻatasi ai ma aʻafiaga sili ona ogaoga e fesoʻotaʻi ma mancozeb ma pyrithiopide.Ona matou fa'atusatusaina lea o le microbial diversity o larvae fafaga i le mancozeb-treated pollen food ma i latou na fafagaina i le control diet.Matou te talanoaina auala e mafai ona fa'avae ai le oti ma a'afiaga mo polokalame tu'ufa'atasia o fa'ama'i fa'ama'i ma pollinator (IPPM)36.
O le O. cornifrons matutua o lo'o fa'afefeteina i popo na maua mai le Nofoaga Autu mo Su'esu'ega Fua, Biglerville, PA, ma teu i le -3 i le 2°C (±0.3°C).A'o le'i faia le su'ega (600 popo i le aofa'i).I le masina o Me 2022, e 100 O. cornifrons cocoons na ave i aso uma i ipu palasitika (50 cocoons i le ipu, DI 5 cm × 15 cm le umi) ma solo i totonu o ipu e faʻalauiloa ai le tatalaina ma maua ai se mea e mafai ona lamu, faʻaitiitia ai le mamafa i luga o le papa. pi37 .Tu'u ipu palasitika se lua o lo'o i ai ni koko i totonu o se pa iniseti (30 × 30 × 30 cm, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) faʻatasi ai ma fafaga 10 ml o loʻo i ai le 50% sucrose solution ma teu mo aso e fa e faʻamautinoa ai le tapunia ma le faʻaipoipo .23°C, susū fa'atatau 60%, photoperiod 10 l (maualalo malosi): 14 aso.100 mated fafine ma tane na tatalaina i taeao uma mo aso e ono (100 i le aso) i ni faamoega faafoliga se lua i le taimi o le tumutumu o le apu (mailei faamoega: lautele 33.66 × maualuga 30.48 × umi 46.99 cm; Faaopoopo Ata 1).Tuu i le Pennsylvania State Arboretum, latalata i sieli (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie ™), peach (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), pear (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus perifolia 'Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), coronaria apple tree (Malus coronaria) ma le tele o ituaiga o apu (Malus coronaria, Malus), apu fale 'Co-op 30' Enterprise™, Malus apple tree 'Co- Op 31' Winecrisp™, begonia 'Saolotoga', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy').O fale manulele palasitika lanumoana taitasi e fetaui i luga o pusa laupapa e lua.O pusa faamoega ta'itasi o lo'o i ai 800 gaogao pepa kraft paipa (spiral matala, 0.8 cm ID × 15 cm L) (Jonesville Paper Tube Co., Michigan) fa'aofi i totonu o paipa cellophane opaque (0.7 OD va'ai Plastic plugs (T-1X plugs) saunia nofoaga e teu ai. .
O pusa faamoega uma e faasaga i sasaʻe ma sa ufiufi i pa palasiti togalaʻau lanu meamata (Everbilt model #889250EB12, lapoʻa tatala 5 × 5 cm, 0.95 m × 100 m) e puipuia ai iʻamu ma manulele ma tuʻu i luga o le eleele i tafatafa o le pusa pusa palapala. pusa.Pusa faamoega (Ata Faaopoopo 1a).Sa aoina fuamoa o saga i aso uma e ala i le aoina mai o faagaau e 30 mai faamoega ma ave i le fale suesue.Fa'aaogā seleulu, fai se tipi i le pito o le fa'agaau, ona talatala lea o le fa'a'au fa'aili e fa'aalia ai sela fa'ato'a.O fuamoa taʻitasi ma a latou poleni na aveese i le faʻaogaina o le spatula piʻo (Microslide toolkit, BioQuip Products Inc., California).O fuamoa na faʻagogo i luga o pepa faamama susu ma tuʻu i totonu o se Petri ipu mo le 2 itula aʻo leʻi faʻaaogaina i a matou suʻega (Faʻaopoopo Faʻamatalaga 1b-d).
I totonu o le fale suʻesuʻe, matou te iloiloina le oona tautala o fungicides e ono na faʻaaogaina aʻo leʻi fuga mai le apu i le tolu faʻatonuga (0.1X, 0.5X, ma le 1X, lea o le 1X o le faʻailoga e faʻaaogaina i le 100 kalone vai / eka. High field dose = concentration. i le fanua)., Laulau 1).O faʻatonuga taʻitasi na toe fai 16 taimi (n = 16).E lua fungicide fa'afeso'ota'i (Laulau S1: mancozeb 2696.14 ppm ma captan 2875.88 ppm) ma fungicides fa'aletino e fa (Laulau S1: pyrithiostrobin 250.14 ppm; trifloxystrobin 110.06 ppm; myclobutanil azole 75 ppm.80 toxic , fualaau faisua ma fuala'au teuteu .Na matou faʻafefiloi le pollen e faʻaaoga ai se olo, faʻafeiloaʻi le 0.20 g i se vaieli (24-well Falcon Plate), ma faʻaopoopo ma faʻafefiloi le 1 μL o le fungicide solution e fausia ai le pyramidal pollen ma le 1 mm vaieli loloto na tuʻu ai fuamoa.Tu'u i le fa'aogaina o se tama'i spatula (Ata Faaopoopo 1c,d).Falcon plates sa teuina i le vevela o le potu (25°C) ma le 70% susū.Na matou fa'atusaina i latou e pulea larvae fafaga i se mea'ai poleni tutusa e togafitia i vai mama.Matou te faamaumauina le tino ma fuaina le mamafa o le larval i isi aso uma seia oʻo i le matua o le larvae e faʻaaoga ai le paleni auʻiliʻili (Fisher Scientific, saʻo = 0.0001 g).Mulimuli ane, sa su'esu'eina le fua faatatau o feusuaiga e ala i le tatalaina o le popo ina ua uma le 2.5 masina.
Na maua mai le DNA mai le atoa o le O. cornifrons larvae (n = 3 i le tulaga o togafitiga, mancozeb-treated and untreated pollen) ma sa matou faia ni suʻesuʻega eseese o microbial i luga o nei faʻataʻitaʻiga, aemaise lava ona o le mancozeb o le maualuga o le oti na matauina i larvae.mauaina o le MnZn.DNA na faʻateleina, faʻamamaina e faʻaaoga ai le DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA kit (Zymo Research, Irvine, CA), ma faʻasolosolo (600 cycles) i luga o le Illumina® MiSeq ™ e faʻaaoga ai le v3 kit.O le fa'atulagaina o fa'asologa o siama 16S ribosomal RNA genes na faia i le fa'aaogaina o le Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) e fa'aaoga ai fa'amuamua e fa'atatau i le V3-V4 itulagi o le 16S rRNA gene.E le gata i lea, o le 18S sequencing na faia i le faʻaaogaina o le 10% PhiX faʻapipiʻi, ma faʻateleina le faʻaogaina e faʻaaoga ai le paipa muamua 18S001 ma le NS4.
Fa'aulufale mai ma fa'agasolo fa'atasi le faitau39 fa'aaoga le paipa QIIME2 (v2022.11.1).O nei faitauga sa teuteu ma tu'u fa'atasi, ma na aveese fa'asologa o chimeric e fa'aaoga ai le DADA2 plugin i le QIIME2 (qiime dada2 pa'o pisa)40.O tofitofiga vasega 16S ma le 18S na fa'atinoina i le fa'aogaina o le mea fa'avasegaina mea fa'apipi'i Classify-sklearn ma le fa'aa'oa'oga a'o le'i a'oa'oina silva-138-99-nb-classifier.
O faʻamatalaga faʻataʻitaʻiga uma na siakiina mo le masani (Shapiro-Wilks) ma le tutusa o eseesega (suʻega a Levene).Talu ai ona o le seti o faʻamaumauga e leʻi ausia manatu o suʻesuʻega parametric ma le suiga ua le mafai ona faʻavasegaina mea totoe, matou te faia se ANOVA e le faʻataʻitaʻi lua (Kruskal-Wallis) faʻatasi ai ma mea e lua [taimi (tolu-vaega 2, 5, ma le 8 aso. taimi) ma fungicide] e iloilo ai le aafiaga o togafitiga i luga o le mamafa fou larval, ona faia lea o le post hoc nonparametric faʻatusatusaga tutusa e faʻaaoga ai le suʻega Wilcoxon.Na matou faʻaogaina se faʻataʻitaʻiga laina lautele (GLM) faʻatasi ai ma le tufatufaina o Poisson e faʻatusatusa ai aʻafiaga o fungicides i luga o le ola i luga ole tolu fungicide concentrations41,42.Mo le su'esu'eina o le tele o eseesega, o le numera o fa'asologa fa'asologa o amplicon (ASVs) na pa'u i le tulaga o le ituaiga.Faatusatusaga o eseesega tele i le va o vaega o loʻo faʻaaogaina le 16S (genus level) ma le 18S relative abundance sa faia e faʻaaoga ai se faʻataʻitaʻiga faʻaopoopo lautele mo le tulaga, fua, ma foliga (GAMLSS) faʻatasi ai ma le beta zero-inflated (BEZI) tufatufaga aiga, lea na faʻataʻitaʻiina i luga o se macro. .i le Microbiome R43 (v1.1).1).Ave'ese ituaiga mitochondrial ma chloroplast a'o le'i su'esu'eina eseesega.Ona o le eseese o tulaga tau lafoga o le 18S, na'o le pito maualalo o lafoga ta'itasi sa fa'aogaina mo su'esu'ega fa'apitoa.O su'esu'ega fa'afuainumera uma na faia e fa'aaoga ai le R (v. 3.4.3., CRAN project) (Team 2013).
O le faʻaalia i le mancozeb, pyrithiostrobin, ma le trifloxystrobin na matua faʻaitiitia ai le mamafa o le tino i O. cornifrons (Fig. 1).O nei a'afiaga na mata'ituina pea mo tui uma e tolu na iloiloina (Fig. 1a-c).Cyclostrobin ma myclobutanil e leʻi faʻaititia tele le mamafa o larvae.
Fuafuaga o le mamafa fou o la'au pupuni e fuaina i le tolu taimi i lalo ole fa togafitiga (mea'ai poleni tutusa + fungicide: pulea, 0.1X, 0.5X ma le 1X tui).(a) Tulaga maualalo (0.1X): taimi muamua (aso 1): χ2: 30.99, DF = 6;P <0.0001, taimi lona lua (aso 5): 22.83, DF = 0.0009;taimi lona tolu;togi (aso 8): χ2: 28.39, DF = 6;(b) afa tui (0.5X): taimi muamua taimi (aso 1): χ2: 35.67, DF = 6;P <0.0001, taimi lona lua (aso muamua).): χ2: 15.98, DF = 6;P = 0.0090;taimi fa'atolu (aso 8) χ2: 16.47, DF = 6;(c) Nofoaga po'o le fua atoa (1X): taimi muamua (aso 1) χ2: 20.64, P = 6;P = 0.0326, taimi lona lua (aso 5): χ2: 22.83, DF = 6;P = 0.0009;taimi lona tolu (aso 8): χ2: 28.39, DF = 6;su'esu'ega e le fa'atatau i le eseesega.O pa o loʻo faʻatusalia le uiga ± SE o faʻatusatusaga faʻalua (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001.
I le fua maualalo (0.1X), o le mamafa o le tino larval na faʻaititia i le 60% ma le trifloxystrobin, 49% ma le mancozeb, 48% ma myclobutanil, ma le 46% ma le pyrithistrobin (Fig. 1a).Pe a faʻaalia i le afa o le fua o le fanua (0.5X), o le mamafa o le tino o le mancozeb larvae na faʻaititia i le 86%, pyrithiostrobin e 52% ma trifloxystrobin e 50% (Fig. 1b).Ole fua atoa ole fanua (1X) ole mancozeb na fa'aitiitia ai le mamafa o le larval ile 82%, pyrithiostrobin ile 70%, ma le trifloxystrobin, myclobutanil ma le sangard e tusa ma le 30% (Fig. 1c).
O le maliu na sili ona maualuga i agogo na fafagaina mancozeb pollen, sosoo ai ma pyrithiostrobin ma trifloxystrobin.Ua faateleina le oti i le faateleina o tui o le mancozeb ma le pyritisoline (Ata 2; Laulau 2).Peita'i, na fa'atupula'ia la'ititi le aofa'i o tagata e sua sana pe a fa'atuputeleina le fa'atupuina o le trifloxystrobin;cyprodinil ma captan e leʻi faʻateleina le faʻateleina o le oti pe a faʻatusatusa i togafitiga faʻatonutonu.
Na fa'atusatusaina le oti o lago lago ina ua uma ona 'aina le poleni na togafitia ta'ito'atasi i fungicides eseese e ono.Mancozeb ma pentopyramide na sili atu ona maaleale i le tautala tautala i ilo sana (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (laina, slope = 0.29, P <0.001; slope = 0.24, P <0.00)).
I le averesi, i togafitiga uma, 39.05% o gasegase o fafine ma 60.95% o tane.Faatasi ai ma togafitiga faʻatonutonu, o le aofaʻi o fafine o le 40% i suʻesuʻega maualalo (0.1X) ma le afa-dose (0.5X), ma le 30% i suʻesuʻega o le fanua-dose (1X).I le 0.1X dose, i totonu o larvae fafaga pollen na togafitia i le mancozeb ma myclobutanil, 33.33% o tagata matutua o fafine, 22% o tagata matutua o fafine, 44% o larvae matutua o fafine, 44% o larvae matutua o fafine.fafine, 41% o larvae matutua o fafine, ma pulea e 31% (Fig. 3a).I le 0.5 taimi o le fua, 33% o anufe matutua i le mancozeb ma le pyrithiostrobin vaega o tamaitai, 36% i le vaega trifloxystrobin, 41% i le myclobutanil vaega, ma le 46% i le vaega cyprostrobin.O lenei fuainumera e 53% i le vaega.i le vaega kapeteni ma le 38% i le vaega e pulea (Fig. 3b).I le 1X dose, o le 30% o le mancozeb group o tamaitai, 36% o le pyrithiostrobin group, 44% o le trifloxystrobin group, 38% o le myclobutanil group, 50% o le vaega pule o tamaitai - 38.5% (Fig 3c) .
Pasene o tama'ita'i ma tama tane pe a mae'a fa'ama'i fungicide.(a) Tulaga maualalo (0.1X).(b) Afa tui (0.5X).(c) Fuafua fanua po'o fua atoa (1X).
16S su'esu'ega fa'asologa na fa'aalia ai o le vaega siama e 'ese'ese i le va o larvae fafaga i le mancozeb-treated pollen ma larvae fafaga i poleni e le'i togafitia (Fig. 4a).O le fa'asinomaga microbial o ga'o e le'i togafitia e fafaga i poleni na maualuga atu nai lo mea na fafaga ile mancozeb-treated pollen (Ata 4b).E ui lava o le eseesega na matauina i le tamaoaiga i le va o vaega e le taua tele, ae na matua maualalo lava nai lo le mea na matauina mo larvae e fafaga i pollen e leʻi togafitia (Fig. 4c).O le tele o mea na faʻaalia ai o le microbiota o larvae fafaga i le pollen pulea e sili atu le eseese nai lo le meaʻai e fafagaina i le mancozeb-treated larvae (Fig. 5a).O suʻesuʻega faʻamatalaga na faʻaalia ai le i ai o le 28 genera o loʻo pulea ma faʻataʻitaʻiga mancozeb-treated (Fig 5b).c Su'esu'ega i le fa'aogaina o le 18S fa'asologa na fa'aalia ai e leai ni eseesega taua (Fa'aopoopo Fa'atusa 2).
O faʻamatalaga SAV e faʻavae i luga o le 16S faʻasologa na faʻatusatusa i le tamaoaiga o Shannon ma matauina le tamaoaiga i le tulaga o le phylum.(a) Au'ili'iliga fa'auluuluga (PCoA) e fa'avae i luga o le fa'atulagaga lautele o meaola ninii i totonu o poleni-fafaga po'o le fa'atonutonuina (lanumoana) ma le mancozeb-fafaga larvae (lanu moli).O fa'amaumauga ta'itasi e fai ma sui o se fa'ata'ita'iga ese'ese.Na fuafuaina le PCoA e faʻaaoga ai le Bray-Curtis mamao o le tufatufaina t multivariate.Ovals o loʻo faʻatusalia ai le 80% tulaga faʻalagolago.(b) Boxplot, fa'amatalaga mata'utia o le tamaoaiga o Shannon (mata) ma le i.Oa mata'utia.Fa'ailoga pusa o lo'o fa'aalia ai atigipusa mo le laina vaeluagalemu, va'aiga va'ava'a (IQR), ma le 1.5 × IQR (n = 3).
Fa'aputuga o nu'u fa'aola microbial o larvae e fafaga i poleni ua togafitia macozeb ma e le'i togafitia.(a) Ole tele ole tele ole la'au microbial e faitau ile togo.(e) Fa'afanua vevela o nu'u fa'ama'i fa'ama'i.Delftia (odds ratio (OR) = 0.67, P = 0.0030) ma Pseudomonas (OR = 0.3, P = 0.0074), Microbacterium (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060);O laina fa'afanua vevela o lo'o fa'apipi'iina e fa'aoga ai le mamao fa'amaopoopo ma feso'ota'iga masani.
O a matou faʻaiʻuga o loʻo faʻaalia ai o le tautala tautala e faʻafesoʻotaʻi (mancozeb) ma le faʻaogaina (pyrostrobin ma trifloxystrobin) fungicides, faʻaaogaina lautele i le taimi o le fuga, faʻaitiitia le mamafa o le mamafa ma faʻateleina le oti o larvae saga.E le gata i lea, o le mancozeb na matua faʻaitiitia ai le eseesega ma le tamaoaiga o le microbiome i le taimi muamua.O le Myclobutanil, o le isi fungicide faʻapitoa, na faʻaitiitia ai le mamafa o le tino i le tolu tui.O lenei aafiaga na faʻaalia i le lona lua (aso 5) ma le tolu (aso 8) taimi taimi.I le faʻatusatusaga, o le cyprodinil ma le captan e leʻi faʻaitiitia ai le mamafa o le mamafa poʻo le ola faʻatusatusa i le vaega e pulea.I lo matou iloa, o lenei galuega o le muamua lea e iloa ai aafiaga o fua o fanua o fungicides eseese o loʻo faʻaaogaina e puipuia ai fua o sana e ala i le faʻaalia saʻo o poleni.
O togafitiga uma o le fungicide e matua fa'aitiitia ai le mamafa o le tino pe a fa'atusatusa i togafitiga fa'atonutonu.O le Mancozeb na i ai le aafiaga sili i luga o le mamafa o le tino larval ma le averesi faʻaititia o le 51%, sosoo ai ma le pyrithiostrobin.Peita'i, o isi su'esu'ega e le'i lipotia mai ni a'afiaga leaga o fuala'au fa'atosina ole fungicide ile la'asaga ole larval44.E ui lava o le dithiocarbamate biocides ua faʻaalia e maualalo le oona oona45, ethylene bisdithiocarbamates (EBDCS) e pei o le mancozeb e mafai ona faʻaleagaina i le urea ethylene sulfide.Ona o ona aafiaga mutagenic i isi meaola, o lenei oloa faʻaleagaina atonu e nafa ma aʻafiaga ua matauina46,47.O su'esu'ega talu ai na fa'aalia ai o le fa'avaeina o le ethylene thiourea e a'afia i mea e pei o le maualuga o le vevela48, maualuga maualuga49 ma le umi o le teuina o oloa50.O tulaga lelei e teu ai mo biocides e mafai ona fa'aitiitia ai nei a'afiaga.E le gata i lea, o le European Food Safety Authority ua faʻaalia le popolega e uiga i le oona o le pyrithiopide, lea ua faʻaalia o le carcinogenic i le digestive system o isi manu51.
Ole tu'u gutu ole mancozeb, pyrithiostrobin, ma le trifloxystrobin e fa'atuputeleina ai le oti ole ga'o saito.I se faʻatusatusaga, o le myclobutanil, ciprocycline ma le captan e leai sona aafiaga i le tino.O nei taunuuga e ese mai i latou a Ladurner et al.52, o le na faʻaalia o le captan na faʻaitiitia ai le ola o tagata matutua O. lignaria ma Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae).E le gata i lea, o fungicides e pei o le captan ma le boscalid ua maua e mafua ai le oti larval52,53,54 poʻo le suia o le fafagaina o le amio55.O nei suiga, i le isi itu, e mafai ona afaina ai le tulaga lelei o meaʻai o le poleni ma mulimuli ane maua ai le malosi o le tulaga o le larval.O le maliu na matauina i le vaega e pulea e tutusa ma isi suʻesuʻega 56,57.
O le fua faatatau o feusuaʻiga e fiafia i ai tane o loʻo matauina i la tatou galuega e mafai ona faʻamatalaina e mea e pei o le le lava mating ma le leaga o le tau i le taimi o le fuga, e pei ona fautuaina muamua mo O. cornuta e Vicens ma Bosch.E ui lava ina fa aso e fai paaga ai fafine ma tama tane i la matou suʻesuʻega (o se vaitaimi e masani ona lava mo le manuia o faigauo), na matou faʻaitiitia le malosi o le moli e faʻaitiitia ai le atuatuvale.Peita'i, o lenei suiga e ono fa'alavelave fa'afuase'i i le fa'agasologa o faigauo61.E le gata i lea, o pi e oo i ni nai aso o le leaga o le tau, e aofia ai le timu ma le maualalo o le vevela (<5°C), lea e mafai foi ona afaina ai le manuia o faigauo4,23.
E ui lava o la matou suʻesuʻega na taulaʻi i le microbiome larval atoa, o matou faʻaiʻuga e maua ai le faʻamalamalamaga i soʻotaga talafeagai i totonu o nuʻu siama e ono taua tele i meaʻai pi ma faʻamaʻi fungicide.Mo se fa'ata'ita'iga, o togo na fafaga i le mancozeb-treated pollen na matua fa'aitiitia ai le fa'atupuina ma le tele o microbial community pe a fa'atusatusa i togo na fafaga poleni e le'i togafitia.I laumei o lo'o 'aina poleni e le'i togafitia, o vaega fa'ama'i o le Proteobacteria ma le Actinobacteria sa iloga ma e tele lava aerobic po'o facultatively aerobic.O siama Delft, e masani ona feso'ota'i ma ituaiga lagomeli nofofua, e iloa o lo'o i ai ni mea fa'ama'i fa'ama'i, e fa'ailoa mai ai se tulaga puipuia mai fa'ama'i.O le isi ituaiga siama, Pseudomonas, sa tele i togo na fafagaina pollen e leʻi togafitia, ae na matua faʻaititia i le mancozeb-treated larvae.O a matou fa'ai'uga e lagolagoina ai su'esu'ega talu ai na iloa ai le Pseudomonas o se tasi o ituaiga sili ona tele i le O. bicornis35 ma isi vaitu'itasi34.E ui lava e leʻi suʻesuʻeina faʻamaoniga faʻataʻitaʻi mo le matafaioi a Pseudomonas i le soifua maloloina o O. cornifrons, o lenei siama ua faʻaalia e faʻaleleia ai le faʻaogaina o toxins puipuia i le pusi Paederus fuscipes ma faʻaleleia le metabolism arginine in vitro 35, 65. O nei faʻamatalaga e fautua mai ai. se sao taua i viral ma siama puipuia i le taimi o le atinae o le O. cornifrons larvae.O le Microbacterium o le isi ituaiga ua iloa i la matou su'esu'ega ua lipotia mai o lo'o i ai i le tele o numera o lago lago a le fitafita uliuli i lalo o le matelaina66.I le O. cornifrons larvae, microbacteria e mafai ona fesoasoani i le paleni ma le faʻaleleia o le microbiome gut i lalo o tulaga faʻalavelave.E le gata i lea, o le Rhodococcus o loʻo maua i le O. cornifrons larvae ma e lauiloa i le faʻamamaina o mea e mafai ai67.E maua foi lenei ituaiga i le gutu o le A. florea, ae matua maualalo lava le tele.O a matou faʻaiʻuga e faʻaalia ai le iai o le tele o fesuiaiga o kenera i luga o le tele o microbial taxa e mafai ona suia ai metabolic process i larvae.Ae ui i lea, e manaʻomia se malamalamaga sili atu i le eseesega o galuega a O. cornifrons.
I se aotelega, o faʻaiʻuga ua faʻaalia ai o le mancozeb, pyrithiostrobin, ma le trifloxystrobin na faʻaititia ai le mamafa o le tino ma faʻateleina le oti o togatogo sua sana.E ui o lo'o fa'atupula'ia le popolega e uiga i a'afiaga o fungicides i pollinators, e mana'omia le malamalama atili i a'afiaga o metabolites o totoe o nei mea fa'apipi'i.O i'uga nei e mafai ona tu'ufa'atasia i fautuaga mo polokalame tu'ufa'atasia mo le puleaina o le pollinator e fesoasoani ai i le aufaifa'ato'aga e aloese mai le fa'aogaina o vaila'au fa'amasani a'o le'i tupu ma i le taimi o le fuga o fuala'au e ala i le filifilia o fungicides ma fesuia'i le taimi e fa'aoga ai, po'o le fa'amalosia o le fa'aogaina o isi mea e le afaina ai 36. O nei fa'amatalaga. e taua mo le atiaeina o fautuaga.i luga o le fa'aogaina o vailaau fa'atosina, e pei o le fetu'una'iga o polokalame fa'afefeteina o lo'o i ai ma le suia o le taimi e fa'afefe ai pe a filifilia fungicides po'o le fa'alauiloaina o le fa'aogaina o isi mea e le mata'utia.E mana'omia nisi su'esu'ega ile a'afiaga leaga ole fungicide ile fua fa'afeusuaiga, amio fafaga, gut microbiome, ma le mole mole e fa'avae ai le pa'u mamafa ma le oti.
Fa'amatalaga puna 1, 2 ma le 3 i Ata 1 ma le 2 ua teuina i le figshare data repository DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 ma https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233.O faʻasologa na suʻesuʻeina i le suʻesuʻega o loʻo i ai nei (Fig. 4, 5) o loʻo maua i le fale teu oloa NCBI SRA i lalo ole numera faʻaopoopo PRJNA1023565.
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